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      細胞培養需要注意什么

       更新時間:2023-01-09 點擊量:764
      細胞培養需要注意什么
      細胞培養需要注意什么

      細胞培養是細胞和分子生物學中使用的關鍵工具。它可以對細胞生理學和細胞生物化學進行建模。此外,細胞培養使研究人員能夠確定藥物和有毒化合物對細胞反應的影響。那么怎么培養出一批好的細胞呢?細胞培養需要注意什么?
      細胞培養需要注意以下幾點:
      一、細胞培養環境
      不同的細胞,培養環境是不同的。這個不僅僅是說培養基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞,比如:內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態會生長的比較好,例如:巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度快,貼壁速度也快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以進行細胞培養的時候應該多探索該細胞喜歡的生長空間密度和生長規律等相關問題,才能培養出理想的細胞。
      二、良好的細胞形態
      對于有些人總是會遇到養的細胞形態怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態不好,(或者細胞形態不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:
      1.倒掉舊的培養基,加入3ml新的培養基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的)
      2.把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養瓶內,培養瓶事先加入培養基,放入培養箱內培養,按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養基,加入3ml新培養基再輕輕洗一次。然后加入培養基培養。后續觀察細胞生長情況以及形態。
      3.如果一次效果還不理想,可重復多次,直到找到細胞合適的形態。這里需要注意的是要結合細胞的生長情況而定。
      三、培養基的量
      由于每種細胞的生長環境不同,對養料需求也是不相同的,這就需要我們取認真了解每種細胞系的特性,根據細胞生長需求及細胞特性來選擇培養基類型和適宜的培養基添加劑。關于培養容器并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養基少一點,細胞形態會長得更好。(可對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養基細胞形態會更好。但是需要注意及時補液、換液,避免細胞死亡。
      四、細胞培養瓶的選擇
      在實驗過程中你常常會發現發現生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態會比一次性塑料瓶相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態也比塑料瓶內好。這可能是因為塑料瓶比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在塑料瓶這種相對“更安逸"的環境里反而長得狀態不如玻璃瓶好。
      所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態,塑料瓶比玻璃瓶會好,對于生長速度快的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,塑料瓶會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。掌握了上面這些小技巧,就能培養出漂亮的細胞了。
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